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細胞系轉染
細胞系可以用 Celetrix 電穿孔以非常高的效率和非常高的細胞活力進行轉染。例如,Jurkat 細胞的轉染效率可達 90% 以上,細胞保持快速生長。
原代細胞轉染
Celetrix 電穿孔技術可以以非常高的效率對原代細胞進行電穿孔。例如,人PBMC用GFP質粒轉染效率為64%,CAR-T2A-GFP用SB轉座子轉染效率可達60-90%。 人iPSC電穿孔效率可達80%以上,細胞保持未分化。與市場上的所有其他電穿孔方法相比,Celetrix 的效率高。
Celetrix TM密封管
1. 毛細管電穿孔的局限性
毛細管壁是絕緣體。當細胞非常靠近毛細血管壁時,細胞和毛細血管壁之間就會形成一條狹窄的通道,供電流通過。由于液體電阻與橫截面積成反比,因此為該狹窄通道分配了更高的電壓。細胞上的有效電穿孔表面也增加了。毛細管效應 (CE) 可以在非毛細管溶液中通過將細胞置于高濃度下類似地實現,從而使它們成為彼此的下一個絕緣體。
毛細管效應對細胞與毛細管壁之間的距離非常敏感。當細胞非常靠近毛細血管壁 ( ) 時,毛細管效應 (CE) 非常強,該細胞需要較低的脈沖電壓。隨著細胞與壁距離的增加 ( ),毛細管效應迅速減弱,該細胞需要更高的脈沖電壓。當細胞放置在距毛細管壁大約兩個細胞直徑的距離 ( ) 時,毛細管效應幾乎為零,并且該細胞需要更高的電壓。
由于毛細管中的所有細胞都經歷來自脈沖發生器的相同電壓脈沖,因此脈沖不可能同樣適用于細胞的所有三個區域。因此,毛細作用機制本質上是有限的。
毛細管電泳的局限性:
1)幫助是局部的和不平等的,本質上不適合高效率;
2) 氣泡未壓縮,電流擾動和飛弧;
3)體積小,使用大容量細胞樣品不方便,成本高;
4) 低功率脈沖發生器,不可擴展。
2. CeletrixTM 密封管
1>. 用于高效電穿孔的均勻電場。
2>。沒有比色皿或毛細管的限制。
3>。樣品體積從小20ul到大800ul的選擇。
4>。快速且經濟高效地處理大樣品。
5>。精度和再現性。
三、CeletrixTM管的優點
mRNA超高效電穿孔
許多免疫和研究應用需要轉染 mRNA。Celetrix 電穿孔技術可以非常高效地對 mRNA 進行電穿孔。
mRNA的轉染率通常高于質粒的轉染率。例如,GFP mRNA 可以以 97.5% 的超高效率電穿孔到 Jurkat 細胞。
細胞中mRNA表達蛋白的水平比質粒表達的蛋白更均勻。然而,mRNA的蛋白質表達水平通常低于強質粒。Celetrix 電穿孔可以幫助實現相對較高的蛋白質表達水平和較長的表達時間。
siRNA 電泳比 mRNA 更容易。通常很容易實現接近 100% 的 siRNA 電穿孔,但蛋白質敲低水平是一個不同的生物學問題,它可能會根據 siRNA 選擇而有所不同。
此外,mRNA 的轉染將有助于一些特殊細胞,例如在質粒電穿孔后往往會死亡的巨噬細胞相關細胞系,而不是 mRNA 電穿孔。例如,BFP mRNA 可以以 98.31% 的超高效率電穿孔至 THP-1 細胞,并且幾乎沒有細胞死亡。
Celetrix 優勢
1、 創造性地將所有哺乳動物細胞類型分為兩組,每組只需微調電壓。操作極其簡單;
2、高效率和細胞活力,即使是大質粒;
3、低成本:
A.低成本套件;
B.通用試劑盒,無需為不同的細胞備貨;
C. 實驗順利,使用的試劑盒較少。
4、誠信理念,*“直接轉染細胞核"、“不同細胞緩沖液"之類的騙局。快速的技術支持解決用戶的電穿孔問題。
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