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moltox-華新
產(chǎn)品時間:2021-11-23
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介紹

 

沙門氏菌致突變性檢測試劑盒中包含的材料幾乎包括所有如Maron所述,進行艾姆斯分析"所需的供應(yīng)

&AmesMaron,D.M.B.N.Ames,沙門氏菌改良方法)突變試驗,突變研究,113:173-2151983)和Mortelmans&ZeigerMortelmans,K.E.Zeiger,艾姆斯沙門氏菌/微粒體致突變性分析,突變研究,455:29-602000)。本手冊簡要概述了測試的重要方面-我們強烈建議您仔細閱讀其中一個在您嘗試執(zhí)行以下操作之前,請參閱這些文件和OECD指南471化驗MOLTOX®的所有元件該套件采用最高標(biāo)準(zhǔn)配方和制造質(zhì)量和部件符合Maron&Ames的建議(同上)。提供的某些材料(如STD冷凍干燥(S9)已經(jīng)過測試由我們的實驗室專門開發(fā)用于包含在分析試劑盒中。大部分工具包中包含的材料附有GLP級質(zhì)量控制和配方說明-您可以放心,每個藥盒的每個元素都已在分析中*測試性能。

 

MOLTOX®

 

沙門氏菌致突變性檢測試劑盒供個人使用  精通微生物學(xué)的科學(xué)和藝術(shù);使用嚴(yán)格的無菌技術(shù)是必要的

 

對于成功應(yīng)用工具包中包含的材料至關(guān)重要。而試劑盒中包括的細菌菌株(鼠傷寒沙門菌菌株TA1535、TA1537、TA98TA100)是減毒的,它們具有潛在的致病性,必須加以處理  照著如果你對菌株的安全處理有任何疑問在您咨詢我們之前,請不要繼續(xù)使用本工具包中包含的內(nèi)容或已獲得熟練生物化學(xué)家的建議;或微生物學(xué)家。

 

Ames分析"的性能包括幾個不同的實驗步驟;例如。,試驗設(shè)計;S9混合配方;加藥和電鍍;表型確認;目標(biāo)細胞效價測定;閱讀(計數(shù))和分析。中包含的材料選擇工具包是為了在以下方面為用戶提供相當(dāng)大的靈活性:測試設(shè)計。本手冊旨在幫助使用工具包內(nèi)容;本手冊中提供的信息旨在補充馬龍和艾姆斯,摩特勒曼和澤格爾的報紙。本手冊中包含的說明雖然以逐步的方式呈現(xiàn),但可以修改-如果您希望在分析的任何階段獲得幫助,請聯(lián)系我們的客戶服務(wù),我們將很高興與您合作,幫助解決任何可能出現(xiàn)的問題。

 

化驗

 

MOLTOX®

 

試劑盒包含四種測試菌株:TA1535、TA1537、TA98TA100在組氨酸操縱子中構(gòu)建具有不同損傷的菌株(見表1,莫特爾曼和澤格爾)。這種突變使它們不能合成組氨酸,即。它們是需要外源性組氨酸的組氨酸營養(yǎng)缺陷型。另外,TA1535,TA1537,TA98TA100改變了細胞壁(rfa),增加了細胞對某些物質(zhì)的滲透性高分子量材料。這些菌株在DNA修復(fù)編碼中也有一個損傷導(dǎo)致對各種誘變劑敏感性增加的基因(uvrB)。從此病變延伸至生物素合成基因(bio),生物素也是生長所必需的]。測試菌株TA98TA100攜帶一個質(zhì)粒(pKM101),其作用是增加易出錯的DNA修復(fù)系統(tǒng)的活性和對抗生素的耐藥性 氨芐西林、測試菌株TA1535TA1537不含質(zhì)粒。由于測試菌株的特性,“Ames分析法"特別適用于誘變活性檢測。幾種測試菌株對DNA成像化學(xué)誘變劑的反應(yīng)不同,因此通常組合使用。每個由于特定的環(huán)境因素,該菌株傾向于對特定類別的致突變化學(xué)物質(zhì)產(chǎn)生反應(yīng) 組氨酸操縱子損傷。然而,暴露于誘變劑可能導(dǎo)致遺傳變異組氨酸操縱子的逆轉(zhuǎn)導(dǎo)致野生型表型的恢復(fù);突變體的組氨酸操縱子功能“恢復(fù)",并能合成組氨酸。分析取決于區(qū)分組氨酸營養(yǎng)缺陷型(測試員)的能力菌株)和組氨酸原營養(yǎng)體(突變體)。相應(yīng)地,目標(biāo)細胞被鍍在表面上含有微量組氨酸的培養(yǎng)基,可進行幾輪細胞分裂必須“修復(fù)"突變事件;組氨酸迅速耗盡,導(dǎo)致細胞停止生長非突變細胞的生長。如果存在致突變化學(xué)物質(zhì),(相對)罕見改變的組氨酸操縱子可能發(fā)生逆轉(zhuǎn),導(dǎo)致生長的繼續(xù)微量組氨酸耗盡后。出現(xiàn)在組氨酸限制酶上的回復(fù)突變菌落培養(yǎng)皿代表原生動物,它們要么是自發(fā)產(chǎn)生的,要么是由于細菌的作用誘變劑。

 

以下章節(jié)描述了進行基本四種應(yīng)變的程序

 

化驗大多數(shù)情況下,所述方法直接取自Maron&Ames(同上)以及后來的Mortelmans&Zeiger。如果您之前沒有使用分析,我們建議您嚴(yán)格遵守這些說明;有經(jīng)驗的方法將查找有關(guān)STDiscs使用的有用信息™, 四元計算機盤子,和凍干S9。

 

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