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新生兒心肌細胞分離
,產率最高
貨號:nc-6031
科學家的正確策略
大多數有關新生大鼠或小鼠心肌細胞分離的方法不僅耗時費力,而且還導致細胞活力低下,這是研究人員最關心的問題。
需要更多細胞來研究細胞生長,分化和死亡的細胞和分子機制的科學家將發現,其實驗無法獲得低產量的細胞。
高性能系統
使用最新更新的心肌細胞分離系統,您將*消除所有這些問題,并在一小時內獲得最健康,產量最高的新生兒心肌細胞。
新生大鼠或小鼠心肌細胞分離系統無風險,保證令人滿意。
產品
貓 # 尺寸 價格
Neomyt套件 nc-6031 6個Rxns $ 415
SureCoat(用于涂布培養板) sc-9035 500毫升
NS培養基(含血清) m-8031 500毫升
NW培養基(無血清)
m-8032 500毫升
* 1個rxn可以處理5至35個新生大鼠心臟,20至80個小鼠心臟
* Neomyt試劑盒中不包含NS培養基和NW培養基
基于miRNA的基因敲低
基于Cellutron miRNA的基因敲除(KD)具有以下優點:
1.高度序列特異性,與靶基因具有100%的同源性
2.比其他基因敲除方法(例如siRNA)更有效
3.允許將兩個或多個miRNA結構克隆到同一表達盒中,以進行單個或多個靶標敲除。
4.具有強大的Pol II啟動子,可在多種細胞類型中高效表達miRNA。5
.產生穩定的基因敲除細胞系
6. GFP或RFP報告基因的表達,用于監測轉染效率
7.細胞毒性很小或沒有
對照敲低載體:不 包含miRNA
miRNA敲低載體: 包含一個miRNA靶標或兩個miRNA靶標
誘導表達載體系統
Cellutron用Cre-Loxp技術開發了一種新型的誘導表達系統,并提供了調節轉基因表達的能力。該系統包含兩個具有強大CAG啟動子的表達載體,用于高效基因表達。pEGFP / RFP-miRNA-BL和pEGFP / RFP-T2A-GOI-BL是EGFP和3X終止序列的表達載體,兩側是兩個loxP位點,其后是一個順反子序列,用于表達RFP和miRNA或編碼蛋白質的轉基因。另外,在miRNA和編碼蛋白質的轉基因的表達盒的下游克隆了殺稻瘟菌素(BL)表達盒(用于在哺乳動物細胞中進行藥物選擇)。與可誘導表達載體共轉染需要pCreER-IRES-Puro。
共轉染后,系統最初僅表達EGFP,這是一種報告蛋白,可方便地監測轉染效率。可以在體外和體內添加4-OHT,以激活Cre重組酶的條件活性形式,從而導致miRNA或編碼蛋白質的轉基因的高水平和受調控的表達。
誘導表達系統使您能夠:
1.在分裂和非分裂細胞(包括成體和胚胎干細胞以及iPS細胞)中高效轉染。
2.在體內和體外條件表達miRNA或編碼蛋白質的轉基因。
3.生成穩定的細胞系,以長期表達miRNA或編碼蛋白質的轉基因。
該系統最初表達EGFP,經過4-OHT處理后,有條件活性形式的Cre重組酶被激活,并通過兩個loxP位點之間的交換催化位點特異性重組,從而導致“固定的” EGFP和終止序列被切除。允許表達RFP和miRNA或編碼蛋白質的轉基因。
OHT(4-hydroxytamoxifen)處理miRNA表達
對于體內注射,將4OHT(Sigma,St.Louis,MO)以20 mg / ml的濃度溶于乙醇,然后用9體積的玉米油(Sigma)稀釋。用26口徑針將稀釋的4OHT(2 mg / ml)腹腔注射(每只動物500 µl)注入動物體內。
對于培養的細胞,將在乙醇中稀釋的4OHT(0.39 mg / ml)直接添加到細胞培養基中(最終濃度:1-2 µM = 0.39-0.78 µg / ml)。
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