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alpco試劑問題與解答
發(fā)布時間： 2023-02-15 點擊次數(shù)： 445次北京華新康信現(xiàn)貨 大力回饋新老客戶，現(xiàn)貨打折出售，現(xiàn)有品牌和種類，新老客戶可以自由選購：Alpco北京試劑alpco常見問題與解答
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alpco問題與解答
所有孔變?yōu)榱了{色用于比色測定
鋼板清洗不足
對于自動清洗機：檢查噴嘴是否堵塞，驗證分配量，并定期清潔以防止和清除任何堆積物。有關(guān)更多維護信息，請參閱用戶手冊。
對于手動沖洗：確保所有井都用沖洗緩沖液強制過滿。避免使用多通道移液管進行清洗。考慮從清洗瓶切換到手持式歧管或自動洗板機，特別是在進行化學(xué)發(fā)光分析時。這里提供了顯示正確洗滌技術(shù)的視頻。
不要跳過清洗或浸泡步驟。如果不在SA-HRP和底物步驟之間清洗，將導(dǎo)致所有井顯示非常高的信號。
酶綴合物污染底物
確保所有容器清潔且標(biāo)記清晰。檢查TMB是否為藍色。如果TMB變?yōu)樗{色，請不要在化驗中使用，并聯(lián)系產(chǎn)品支持人員。使用前不要將基材暴露在陽光下。使用新的試劑容器添加每個組分。
高背景（空白或0標(biāo)準(zhǔn)值過高）
鋼板清洗不足
對于自動清洗機：檢查噴嘴是否堵塞，驗證分配量，并定期清潔以防止和清除任何堆積物。有關(guān)更多維護信息，請參閱用戶手冊。
對于手動沖洗：確保所有井都用沖洗緩沖液強制過滿。避免使用多通道移液管進行清洗。考慮從清洗瓶切換到手持式歧管或自動洗板機，特別是在進行化學(xué)發(fā)光分析時。這里提供了顯示正確洗滌技術(shù)的視頻。
不要跳過清洗或浸泡步驟。
舊的或受污染的洗滌緩沖液
清洗緩沖液存放時間過長或留在自動清洗管中會導(dǎo)致污染。根據(jù)需要準(zhǔn)備新鮮的洗滌緩沖液，并定期清潔自動洗滌設(shè)備。
酶綴合物污染底物
確保所有容器清潔且標(biāo)記清晰。檢查TMB是否為藍色。如果TMB變?yōu)樗{色，請不要在化驗中使用，并聯(lián)系產(chǎn)品支持人員。使用前不要將基材暴露在陽光下。使用新的試劑容器添加每個組分。
錯誤的共軛稀釋
高于正常濃度可能導(dǎo)致背景升高。檢查殘余體積并確認(rèn)綴合物制備正確。
讀板器中使用了錯誤的過濾器
確認(rèn)在讀取銘牌時使用了協(xié)議中指示的正確過濾器。包括使用說明中所示的建議減去空白或OD讀數(shù)。
標(biāo)準(zhǔn)品和樣品無顯色或OD讀數(shù)非常低
讀板器中使用了錯誤的過濾器
確認(rèn)在讀取銘牌時使用了協(xié)議中指示的正確過濾器。
試劑配制錯誤
確保所有容器都有清晰的標(biāo)記，并將適當(dāng)?shù)臐饪s液和稀釋劑添加到正確的小瓶中，以使每個“工作"成分用于分析。
試劑混合不充分
使用前，讓重組試劑放置在手冊中所示的時間長度內(nèi)。使用適當(dāng)?shù)脑O(shè)備（渦流混合器等）確保試劑在使用前是均勻的。
板材晃動不足
不正確的搖動運動會導(dǎo)致混合不足和抗體/分析物相互作用。按照使用說明中建議的速度搖動板。建議使用半徑很小的軌道運動振動器。參見示例。
試劑中的混合
如果一次運行多個分析，請將試劑分開以避免混淆。在向分析板添加試劑之前，仔細(xì)檢查試劑標(biāo)簽。
試劑被污染或添加順序錯誤
驗證所有化驗成分的外觀、儲存條件和有效期。按照協(xié)議中的步驟進行操作。確保按正確順序添加每個組件。
使用了備用部件批次或過期部件
某些組件具有高度的批次特異性。務(wù)必與制造商核實是否使用了備用部件批次。不要使用過期的試劑。
未正確遵循分析培養(yǎng)時間
遵循方案中所示的培養(yǎng)時間和溫度。降低任一因素都會影響測定動力學(xué)，并可能導(dǎo)致低信號。如果方案列出了TMB培養(yǎng)的時間范圍，則確保在建議的最長時間內(nèi)培養(yǎng)試驗。
延遲讀取板材
如果進行化學(xué)發(fā)光ELISA，則應(yīng)在短時間內(nèi)讀取平板。有關(guān)套件特定時間，請參閱協(xié)議。延遲讀取印版會導(dǎo)致信號降低。
僅樣品無顯色或OD讀數(shù)非常低
實驗設(shè)計中的錯誤
調(diào)查樣品來源。如果可能，使用替代方法測試樣品，以確認(rèn)樣品在工作測定范圍內(nèi)對感興趣的生物標(biāo)志物應(yīng)為陽性。當(dāng)刺激生物標(biāo)志物生產(chǎn)時，可能需要調(diào)整實驗設(shè)計。
樣品處理不正確
確保樣品未在室溫或冷藏條件下長時間暴露。驗證樣品未經(jīng)歷重復(fù)的凍融循環(huán)。如果可能，在≤-70°C的溫度下等分并儲存樣品。
樣本稀釋計算錯誤
驗證樣品稀釋度是否正確。如有必要且在試劑盒規(guī)格范圍內(nèi)，以較高濃度（較低稀釋度）重新測試樣品。
未驗證的樣本類型
未經(jīng)驗證的樣品類型可能與試劑盒的測定緩沖液或測定范圍不兼容。
板材晃動不足
不正確的搖動運動會導(dǎo)致混合不足和抗體/分析物相互作用。按照使用說明中建議的速度搖動板。建議使用半徑很小的軌道運動振動器。參見示例。
控制超出范圍
試劑處理不正確
確保試劑已正確儲存和處理，且在有效期內(nèi)。注意，一些試劑在重構(gòu)后的保質(zhì)期有限。
標(biāo)準(zhǔn)曲線差
驗證是否使用了適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)曲線，并對照先前分析的值和分析證書中給出的值檢查結(jié)果。有關(guān)更多信息，請參閱“較差標(biāo)準(zhǔn)曲線"部分。注：對于化學(xué)發(fā)光測定，不同的化學(xué)發(fā)光讀數(shù)器的RLU可能會有很大差異。
標(biāo)準(zhǔn)品和/或?qū)φ掌分貥?gòu)錯誤
有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)品/校準(zhǔn)品和對照品重構(gòu)的正確體積和緩沖液，請參見方案和批次特定分析證書。使用前，讓重組試劑放置在手冊中所示的時間長度內(nèi)。使用適當(dāng)?shù)脑O(shè)備（渦流混合器等）確保試劑在使用前是均勻的。
使用了錯誤的曲線擬合
使用方案中建議的曲線擬合。如果提供了多個建議，請使用適合標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)點的回歸方法。強烈建議使用帶有4參數(shù)和5參數(shù)回歸選項的軟件程序。
樣本的意外結(jié)果
樣品制備不當(dāng)
按照方案中的方法進行適當(dāng)?shù)臉悠分苽洹４_保樣品未在室溫或冷藏條件下長時間暴露。驗證樣品未經(jīng)歷重復(fù)的凍融循環(huán)。如果可能，在≤-70°C的溫度下等分并儲存樣品。
樣本ID混淆
檢查樣本ID，以確認(rèn)其已正確標(biāo)記并添加到平板上。
樣品稀釋誤差
如有必要，驗證樣品稀釋度是否正確，外推的樣品值是否與正確的稀釋系數(shù)相乘。
報告單位的差異
驗證報告的計量單位與分析的計量單位一致。執(zhí)行任何必要的換算計算。當(dāng)比較不同試劑盒中獲得的值時，如果有參考標(biāo)準(zhǔn)，確保校正化驗校準(zhǔn)中的任何差異。
實驗設(shè)計中的錯誤
調(diào)查樣品來源。如果可能，使用替代方法測試樣本，以確認(rèn)預(yù)期樣本值。當(dāng)刺激生物標(biāo)志物生產(chǎn)時，可能需要調(diào)整實驗設(shè)計。
干擾物質(zhì)
考慮與樣本基質(zhì)（如使用抗凝劑）、臨床診斷（如類風(fēng)濕因子）或治療相關(guān)的潛在干擾物質(zhì)。
特異性
由于糖基化、蛋白質(zhì)折疊和抗體特異性的差異，不同系統(tǒng)（大腸桿菌、酵母、哺乳動物細(xì)胞系）中表達的天然蛋白質(zhì)和重組蛋白質(zhì)的識別可能有所不同。不同供應(yīng)商的套件可能會有不同的認(rèn)可度。
含量漂移：從板開始到結(jié)束的值差異
因重組或稀釋導(dǎo)致的延遲
在開始化驗工作流程之前，準(zhǔn)備好標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和稀釋樣品。
試劑不在溫度下
在開始化驗前，確保所有所需試劑處于使用說明書中規(guī)定的室溫。
向第一口井和最后一口井添加試劑之間的延長時間
如果可能，在稀釋板或微量滴定管中制備標(biāo)準(zhǔn)品和對照品，然后使用多通道移液管轉(zhuǎn)移至測定板。使用試劑容器和多通道移液管將常用試劑添加到測定板中。
批間變異性（對照品或在不同平板上測試的樣品的精度差）
操作員間可變性
觀察試劑制備、移液技術(shù)和測定時間的差異。
移液管校準(zhǔn)的差異
移液管校準(zhǔn)的差異可能會導(dǎo)致可變性，特別是在移液量較小時。
儀器儀表的差異
當(dāng)在同一天或不同的日子在多個平板上測試樣品或?qū)φ掌窌r，應(yīng)在相同的設(shè)置下使用相同的平板振動器、平板清洗器和平板讀取器。
環(huán)境條件的變化
注意溫度的差異。請記住，一般室溫、靠近窗戶（尤其是在非常寒冷或非常晴朗的日子）以及靠近可能會散發(fā)熱量的儀器可能會影響化驗溫度。
樣品處理的差異
額外的凍融循環(huán)或在室溫或冰箱中增加的時間可能會影響樣品結(jié)果。
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